细胞蜡块技术,就是将患者体液或细针抽取的零散细胞,像“砌砖”一样收集、凝固成一个小蜡块,从而可以像组织一样切成薄片、染色,进行更精准诊断的病理技术。
一、为什么要做细胞蜡块?
常有患者因不明原因的胸/腹水到医院就诊,有时临床高度怀疑恶性胸/腹水,但因受积液干扰,影像学检查有时无法准确呈现病灶;部分患者也难以通过内镜、穿刺活检或手术切除等途径获得组织标本;对于年老体弱、晚期肿瘤患者,组织标本的获取更为困难。此时,穿刺引流的胸/腹水就成为了实现病理诊断非常珍贵的标本。传统的细胞涂片(图1)是最基础的细胞学制片,在病理科已被广为应用,但这一方法也有不可忽视的缺点:单一的细胞学涂片缺乏组织学结构,且仅从形态学上较难确定肿瘤细胞的来源和具体类型,给疾病的诊断带来了很大困扰。
图1
细胞蜡块技术完美解决了这个问题:
1.收集所有细胞:将全部液体标本离心,把液体里所有的细胞“沉淀”收集起来,一个都不浪费。
2.固定与保存:用福尔马林等固定液保存细胞结构,防止细胞退变。
3.凝固成块:把收集到的细胞团,用95%乙醇固定,凝固成一个小小的、肉眼可见的“细胞球”。
4.石蜡包埋:将这个“细胞球”放入融化的石蜡中,冷却后,它就变成了一个坚硬的 “细胞蜡块”。
二、细胞蜡块能做什么?
1.可以连续切片,进行苏木素-伊红染色(图2):
图2
2.进行免疫组织化学染色(图3、4):
这是最重要的优势!用特定的抗体可以鉴别癌细胞是来自肺、乳腺还是胃肠道;可以检测癌细胞是否有特定的靶点(如PD-L1、HER2等),为靶向治疗和免疫治疗提供直接依据。
图3
图4
3.分子病理检测:对于珍贵的蜡块切片,可以提取DNA/RNA,进行:
基因检测:寻找肺癌、肠癌等相关的驱动基因突变(如EGFR、ALK、KRAS等),这是选择靶向药的“金标准”。
原位杂交:检测基因扩增(如HER2)或融合(如ALK),辅助诊断和用药。
长期保存归档:蜡块可保存几十年,可用于后续复查或检测。
三、哪些情况会用到细胞蜡块?
任何含有细胞的体液或穿刺物都可以制作,尤其适用于:
体腔积液:如胸水、腹水、心包积液。查找其中是否有癌细胞,并判断来源。
细针穿刺物:如甲状腺、胰腺、肺部、淋巴结的穿刺。当穿刺出的组织条很少时,制成细胞蜡块是最大化利用样本的方法。
灌洗液、冲洗液:如支气管灌洗液、膀胱冲洗液。
脑脊液、尿液等。
四、对进行细胞蜡块检测的胸腹水标本有些什么要求呢?
1.样本送检量:临床应尽可能收集100ml以上的浆膜腔积液送检,或在保障患者安全的前提下将收集的体液全部送检;
2.存放容器:存放于硬质不吸水密闭洁净容器,并清晰标识患者基本信息;
3.送检时间:标本离体后30分钟内应送至病理科,如暂时无法送检,应将标本冷藏在0-4℃冰箱内,冷藏时间小于24小时。
总结来说:细胞蜡块是病理技术的一项重大进步。它把过去难以深入分析的“散兵游勇”般的细胞,变成了一个可以反复研究、进行高端分子检测的“细胞档案库”。对于肿瘤患者,尤其是晚期无法手术的患者,细胞蜡块往往是为他们争取精准治疗方案、实现“一把针(穿刺)定乾坤”的重要基石。